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Procedimentos de extração de DNA

ADN é a receita para a vida; dentro de seus bilhões de códigos de estabelecer as bases para os organismos . O estudo e análise de DNA - em tudo, desde a genealogia para investigações criminais - tornou-se muito comum. Para analisar o ADN , no entanto , deve primeiro ser extraído a partir de uma amostra . Quer se trate de uma mecha de cabelo ou um pouco de sangue, o DNA pode ser encontrado em quase tudo que compõe um organismo e os seus procedimentos de extração foram aperfeiçoadas ao longo das décadas .
Lise Celular

Lise é a ação pela qual as células são literalmente quebrado , fazendo com que o seu conteúdo para derramar para análise. As células que contêm a amostra de ADN a ser extraídos devem ser abertas , permitindo assim o acesso ao ligado , ou o fluido dentro . Isto é conseguido através de vários métodos , o mais comum dos quais é sonicando . Sonicação é o processo pelo qual os condensados ​​de som é aplicado às células , agitando-os , assim, e quebrando as reacções intermoleculares . Outros métodos para induzir lise incluem a introdução de um vírus , que quebra -la aberta a partir do interior; enzimas que comer fora em sua superfície; e osmose , que envolve a colocação das células em água , permitindo que o fluido no interior delas para tornar a sua distância para o lado de fora , onde pode ser extraída .
Membrana remoção

Em seguida , os lípidos em torno da membrana da célula tem de ser removido . Os lípidos são os tipos de gorduras , ceras , monoglicéridos , fosfolípidos e de outras substâncias moleculares que ocorrem naturalmente , utilizados como componentes estruturais para as membranas celulares , dando-lhes uma certa rigidez . Estes são removidos por lavagem lisado das células, a uma solução de detergente , geralmente uma forma de ácido crómico .
Remoção Proteína

Após os lípidos foram removidos com sucesso a partir do lisado , agora é importante para remover quaisquer proteínas restantes. Isto é conseguido através da adição de que é conhecido como uma protease . A protease é uma enzima especial destinada a quebrar as proteínas dadas . Esta ação é chamada proteólise , enquanto que a protease provoca a hidrólise (quebra ) dos títulos que possuem aminoácidos juntos. Os aminoácidos formam as proteínas , e sem a sua configuração , a proteína quebra.
Precipitante

É finalmente tempo para ver o DNA puro. Isto pode ser feito por imersão do lisado em álcool gelado , geralmente etanol . Desde DNA é insolúvel em álcool , ele vai se aglutinarem . Quando a mistura é agitada com uma colher de metal , o ADN será visivelmente enrole em volta do metal , que se assemelha de algodão branco . Isto é conhecido como a precipitação , com o ADN conhecida como precipitado de ADN .
Isopropanol

juntamente com o etanol , o isopropanol é utilizado ocasionalmente também se extrair ADN precipitado . No lado positivo , que é mais eficiente do que o etanol , obtendo-se uma concentração mais elevada de ADN quando utilizado . No entanto , também é muito menos volátil e requer mais tempo para secar . Também pode ser notado que o ADN pode não aderir bem à colher ou tubo quando se utiliza isopropanol .