O primeiro passo nos procedimentos diretos bacterianas de coloração é a preparação de um esfregaço . Células de uma cultura ou de uma amostra são espalhados como uma película fina sobre uma lâmina de vidro de microscópio , secas e fixadas utilizando o calor ou um fixador química . Fixação do esfregaço atribui as bactérias para o slide e os impede de serem arrastadas durante o processo de coloração. Manchas deve ser fina o suficiente para permitir a observação de células individuais e fixa o suficiente para permitir repetidas lavagens durante o processo de coloração.
Stains
Por causa de seu alto teor de água , micróbios são quase incolor. Coloração melhora -los e revela suas características diferentes. As manchas são geralmente sais compostos de partículas carregadas , chamadas íons. Quando misturada com a água , um sal dissocia-se em catiões carregados positivamente e aniões com carga negativa . Manchas são sais em que tanto os cátions ou ânions são coloridas . Dependendo do tipo de ião carrega a cor , manchas microbiológicos comuns são ou básica ou ácida . Manchas básicas contêm cátions e ânions coloridas incolores. Exemplos de manchas básicas incluem azul de metileno, fucsina básica e cristal violeta. Manchas ácidas ter colorido cátions e ânions incolores. Exemplos incluem eosina, vermelho Congo e nigrosina .
Princípio
bactérias carregam uma ligeira carga líquida negativa . Consequentemente, eles atraem e se ligam manchas básicos carregados positivamente . Porque as próprias bactérias reter o corante , o processo é um método de coloração directa . Uma mancha direta pode ser simples ou diferencial. Coloração simples usa um corante para revelar o tamanho , forma e disposição das bactérias . Uma mancha diferencial , tal como a coloração de Gram , utiliza dois corantes básicos de cores diferentes para distinguir tipos de bactérias , em adição às suas características físicas . Técnicas de coloração indiretos , ou negativas usar manchas ácidas. As bactérias repelir o corante e permanecer incolor contra o fundo de retenção de mancha.
Vantagens
coloração direta de células bacterianas é a técnica mais comumente utilizada para a visualização de bactérias. É barato , simples e relativamente rápido . Esta técnica proporciona aos profissionais de cuidados de saúde com resultados no mesmo dia , uma vantagem potencial salva-vidas quando o diagnóstico e tratamento de algumas infecções, como a meningite bacteriana . Esfregaços corados diretos são preparações permanentes que podem ser reexaminados em um momento posterior , se necessário. Porque coloração direta mata as bactérias , o risco de infecção de lidar com a mancha é reduzida.